Zajęcia fakultatywne: Elektrofizjologia komórki 1717-F-WF34-J
Elektrofizjologia komórki zajmuje się zjawiskami elektrycznymi występującymi w komórkach nerwowych, mięśniowych, nabłonkowych i innych. Podstawą teoretyczną dyscypliny są teorie fizyczne i chemiczne dotyczące zjawisk elektrycznych, a podstawą doświadczalną pomiary napięcia lub natężenia jonowych prądów elektrycznych za pomocą mikroelektrod. Zjawiska elektryczne na poziomie molekularnym dotyczą kanałów jonowych i transporterów jonów, a na poziomie narządu bądź organizmu dotyczą zmian pola elektrycznego uwidocznionych jako badanie elektrokardiograficzne - EKG, elektroencefalograficzne - EEG, badane elektromiograficzne - EMG i inne. Pomiaów dokonuje się z pomocą elektrod ze stałych przewodników lub mikropipet wypełnionych roztworem KCl
Badania wykonuje się na całych żywych organizmach, na wyciętych tkankach, na rozdzielonych pojedyńczych komórkach, na hodowlach
tkankowych i komórkowych a także w układach hybrydowych.
W pomiarach wewnątrzkomórkowych stosuje się mikroelektrody szklane, które mogą tworzyć z błoną komórkową połączenie o bardzo wysokim oporze elektrycznym, co wykorzystano w metodzie pomiarowej nazwanej klamrą łatkową. Ta technika umożliwia w zależności od zastosowania pomiar prądów jonowych przez całą błonę komórki lub też pomiar prądów pojedyńczego kanału jonowego zaznajdującego się w "łatce" błony komórkowej w ujściu mikropipety. Elektrody zlokalizowane pozakomórkowo z zależnosci od wielkości rejestrują zjawiska elektryczne dotyczące pojedyńczej komórki - rejestracja pojedyńczej jednostki (czynnościowej), (ang. single-unit recording), lub też wielu komórek - wielu jednostek (ang. multi-unit recording), a także zsynchronizowane znaczące zmiany na większym obszarze nazywane miejscowymi zmianami pola elektrycznego (ang. local-field potential), wreszcie jeszcze większe zmiany rejestruje się w zastosowaniach medycznych, gdy dotyczą narządów (EKG, EEG, EMG i innych).
Optyczne techniki elektrofizjologiczne wykorzystują zmiany widmowe wynikające ze zmian napięcia przez błonę komórkową a dotyczące barwników zlokalizowanych w błonie komórkowej. Takie barwniki, np. di-4-ANEPPS, di-8-ANEPPS, RH237, ANNINE-6 plus są określane jako barwniki wrażliwe na napięcie, lub barwniki potencjometryczne.
Pomiary amperometryczne wykorzystuje się do analizy mechanizmów
regulujących zjawiska elektrofizjologiczne, gdy oznaczane substraty podlegają reakcjom oksydoredukcyjnym w środowisku pomiarów elektrodowych.
Wspólczesne modyfikacje i udoskonalenia metodyczne dotyczą planarnej klamry łatkowej, pomiarów w oparciu o sztuczne błony lipidowe utworzone na stałym podłożu - SSM (ang. solid supported membrane), pomiarów na podstawie analizy bioelektrycznej - BERA (ang. bioelectric recognition assay) polegajacej na pomiarach zmian potencjału elektrycznego unieruchomionych w żelu komórek.
Podstawowe problemy elektrofizjologii komórki dotyczą potencjału spoczynkowego błony komórkowej, potencjału czynnościowego i jego zróznicownia w różnych komórkach, mechanizmów przemieszczania się potencjału czynnościowego w błonie komórkowej, zjawisk elektrycznych w synapsach i innych połączeniach międzykomórkoqwych, elektrofizjologii receptorów fizjologicznych, ważnym działem są molekularne podstawy zjawisk elektrofizjologicznych dotyczące budowy, funkcji i organizacji komórkowej białek transportujących jony i białek regulujących zjawiska elektrofizjologiczne.
Koordynatorzy przedmiotu
Literatura
podstawowa
W. C. Conley, W. J. Brammar: The Ion Channel Facts Book, Academic Press, London, 1999.
F. M. Ashcroft: Ion Channels and Diseases. Academic Press, San Diego, 2000.
T. Tyrakowski: Drogi oddechowe; w Patofizjologia,
red. S. Maśliński i J. Ryżewski, PZWL, Warszawa, 1998.
G. G, Matthews: Neurobiologia, PZWL, Warszawa, 2000.
G. M. Fuller, D. Shields: Podstawy molekularne biologii komórki, PZWL, Warszawa 2000.
L. Kłyszejko-Stefanowicz: Cytobiochemia, PWN, Warszawa, 2000.
Fizyczne metody badań w biologii i medycynie, PWN, Warszawa, 2000.
S. Ball: Chemia szarych komórek - neurochemia i toksykologia ośrodkowego układu nerwowego, Medyk ,2003.
S. Konturek: Podstawy Fizjologii Człowieka - układ nerwowy i narządy zmysłów, Wyd. U. Jagiell., 2009.
uzupełniająca
Tyrakowski T.: Prawidłowa i zaburzona funkcja kanału
chlorkowego CFTR - biochemiczna analiza mukowiscydozy.
Post. Bioch. 39:25-32. 1993.
Tyrakowski T. i wsp.: Elektrofizjologiczne badania miejscowych
zmian transportu jonów w ścianie tchawicy in vitro. Ann. Acad. Med.
Stetin. 43: 99-111, 1997.
Tyrakowski T., i wsp.: Electrophysiological study of the
interaction between epithelium and the airway luid lining.
Int. Rev. Allergol. Clin. Immunol., 4, 59-65, 1998.
Tyrakowski T., i wsp.: Reappraisal of amiloride action
on transepithelial electrical potential difference of isolated
tracheal wall. Arch. Immunol. Ther. Exp., 46, 45-50, 1998.
potential difference of isolated tracheal wall. Pol. J. Phar. 49: 53-58, 1997.
Greczko I., Tyrakowski T.: The effect of serotonin on airway
transepithelial sodium ion pathways. European Journal of
Pharmacology , 412, 113-119, 2001.
Smuszkiewicz P., Tyrakowski Tomasz, Drobnik L.: Płynna
wyściółka dróg oddechowych i transport śluzowo-rzęskowy. Czy
znieczulenie ogólne może wpłynąć na ich funkcję? Anest. Intens. Ter.
2005 T. 37 s. 200-206.
Tyrakowski T., Smuszkiewicz P., Drobnik L., Marzec M.,
Młodzik-Danielewicz N., Lelińska A., Kaczorowski P.: Effects of
halothane and isoflurane on stimulated airway transepithelial ion
transport. Pharm. Rep. 2005 Vol. 57 S. 550-555.
Więcej informacji
Dodatkowe informacje (np. o kalendarzu rejestracji, prowadzących zajęcia, lokalizacji i terminach zajęć) mogą być dostępne w serwisie USOSweb: